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食品微生物的檢驗指標(biāo)有哪些?臨床微生物快速藥敏檢測技術(shù)分析儀臨床應(yīng)用,意味著什么 ?健明迪

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必需收藏!微生物檢測要求匯總

一、無菌操作要求

1. 接種細菌時必需穿任務(wù)服、戴任務(wù)帽。

2. 停止接種食品樣品時,必需穿公用的任務(wù)服、帽及拖鞋,應(yīng)放在無菌室緩沖間,任務(wù)前經(jīng)紫外線消毒后運用

3. 接種食品樣品時,應(yīng)在進無菌室前用肥皂洗手,然后用75%酒精棉球?qū)⑹植翝崈?/b>。

4. 停止接種所用的吸管,平皿及培育基等必需經(jīng)消毒滅菌,翻開包裝未運用完的器皿,不能放置后再運用,金屬用具應(yīng)高壓滅菌或用95%酒精撲滅炙烤三次后運用。

5. 從包裝中取出吸管時,吸管尖部不能觸及外露部位,運用吸管接種于試管或平皿時,吸管尖不得觸及試管或平皿邊

6. 接種樣品、轉(zhuǎn)種細菌必需在酒精燈前操作,接種細菌或樣品時,吸管從包裝中取出后及翻開試管塞都要經(jīng)過火焰消毒

7. 接種環(huán)和針在接種細菌前應(yīng)經(jīng)火焰炙烤全部金屬絲,必要時還要燒到環(huán)和針與桿的銜接處,接種結(jié)核菌和烈性菌的接種環(huán)應(yīng)在沸水中煮沸5min,再經(jīng)火焰炙烤。

8. 吸管吸取菌液或樣品時,運用相應(yīng)的橡皮頭吸取,不得直接用口吸

二、無菌間運用要求

1. 無菌間通向外面的窗戶應(yīng)為雙層玻璃,并要密封,不得隨意翻開并設(shè)有與無菌間大小相應(yīng)的緩沖間及推拉門,另設(shè)有0.5~0.7m2的小窗,以備進入無菌間后傳遞物品。

2. 無菌間內(nèi)應(yīng)堅持清潔,任務(wù)后用2%~3%煤酚皂溶液消毒,擦拭任務(wù)臺面,不得寄存與實驗有關(guān)的物品

3. 無菌間運用前后應(yīng)將門關(guān)緊,翻開紫外燈,如采用室內(nèi)懸吊紫外燈消毒時,需30W紫外燈,距離在1.0m處,照射時間不少于30min,運用紫外燈,應(yīng)留意不得直接在紫外線下操作,以免惹起損傷,燈管每隔兩周需用酒精棉球悄然擦拭,除去下面灰塵和油垢,以增加紫外線穿透的影響。

4. 處置和接種食品標(biāo)本時,進入無菌間操作,不得隨意出入,如需求傳遞物品,可經(jīng)過小窗傳遞

5. 在無菌間內(nèi)如需求裝置空調(diào)時,則應(yīng)有過濾裝置

三、消毒滅菌要求

微生物檢測用的玻璃器皿、金屬用具及培育基、被污染和接種的培育物等,必需經(jīng)滅菌前方能運用。干熱和干冷高壓蒸氣鍋滅菌方法。

1.滅菌前預(yù)備 (1)一切需求滅菌的物品首先應(yīng)清洗晾干,玻璃器皿如吸管、平皿用紙包裝嚴(yán)密,如用金屬筒應(yīng)將下面通氣孔翻開。 (2)裝培育基的三角瓶塞,用紙包好,試管蓋好蓋注射器須將管芯抽出,用紗布包好。

2.裝放 (1)干熱滅菌器:裝放物品不可過擠且不能接觸箱的四壁。 (2)大型高壓蒸氣鍋:放置滅菌物品區(qū)分包扎好,直接放入消毒筒內(nèi),物品之間不能過擠。

3.設(shè)備反省 (1)反省門的開關(guān)能否靈敏,橡皮圈有無損壞,能否平整。 (2)反省壓力表蒸氣排盡時能否停留在零位,關(guān)好門和蓋,通蒸氣或加熱后,觀察能否漏氣,壓力表與溫度計所標(biāo)示的狀況能否吻合,管道有無梗塞。 (3)對有自動電子順序控制裝置的滅菌器,運用前應(yīng)反省規(guī)則的順序,能否契合于停止滅菌處置的要求。

4.滅菌處置

(1)干熱滅菌法: 此法順應(yīng)于在干熱狀況下,不損壞、不蛻變、不蒸發(fā)的物品、較常用于玻璃器皿、金屬制品、陶瓷制品等的滅菌。 ① 器械器皿應(yīng)清洗后再干烤,以防附著在外表的污物炭化。 ② 滅菌時安放物品不能過擠,不要直接接觸底和箱壁,物品之間留有空隙。 ③ 滅菌時將箱門關(guān)緊,接上電源,先將排氣孔翻開約30min,掃除滅菌器中的冷空氣,溫度升至160℃調(diào)理指示燈,維持1.5~2h。 ④ 滅菌終了后或溫度升溫進程中,須在60℃以下才干翻開箱門

(2)手提式高壓鍋或立式壓力蒸氣滅菌器的運用應(yīng)按下列步驟停止: ① 手提式高壓鍋在主體內(nèi)參與3L清水,立式高壓鍋加水16L(重復(fù)運用時應(yīng)將水量補足,水變混濁需改換); ② 手提式壓力鍋將頂蓋上的排氣管拔出消毒桶內(nèi)壁的方管中(無軟管或軟管銹蝕分裂的滅菌器不得運用); ③ 蓋好頂蓋擰緊,勿使漏氣;置滅菌器于火源上加熱,立式壓力鍋通上電源,并翻開頂蓋上的排氣閥放了冷氣(水沸騰后排氣10~15min); ④ 封鎖排氣閥,使蒸氣壓上升到規(guī)則要求,并維持規(guī)則時間(按滅菌物品性質(zhì)與有關(guān)狀況而定); ⑤ 到達規(guī)則時間后,對需枯燥的物品,立刻翻開排氣閥排出蒸氣,待壓力恢復(fù)到零時,自然冷卻至60℃后開蓋取物,如為液體物品,不要翻開排氣閥,而應(yīng)立刻將鍋去除熱源,待自然冷卻,壓力恢復(fù)至零,溫度降到60℃以下,再開蓋取物,以防突然減壓液體猛烈沸騰或容器爆破。

(3)臥式壓力鍋蒸氣滅菌器的運用按下列步驟停止: ① 關(guān)緊鍋門,翻開進氣閥,將蒸氣引入夾層停止預(yù)熱,夾層內(nèi)冷空氣經(jīng)阻氣器自動排出; ② 夾層到達預(yù)定溫度后,翻開鍋室進氣閥,將蒸氣引入鍋室,鍋室內(nèi)冷空氣經(jīng)鍋室阻氣器自動排出; ③ 待鍋室到達規(guī)則的壓力與溫度時,調(diào)理進氣閥,使堅持恒定; ④ 自然或人工降溫至60℃再開門取物,不得運用快速排出蒸氣法,以防突然降壓,液體猛烈沸騰或容器爆破; ⑤ 運用自動順序控制式壓力蒸氣滅菌器,在放好物品關(guān)緊門后,應(yīng)依據(jù)物品類別按動相應(yīng)開關(guān),以便按要求順序自動停止滅菌,滅菌時必需應(yīng)用附設(shè)儀表記載溫度與時間以備查,操作要求應(yīng)嚴(yán)厲依照廠家說明書停止;

5.滅菌溫度與時間 (1) 干熱滅菌器滅菌溫度160℃,1.5~2h。 (2) 壓力蒸氣滅菌鍋滅菌溫度與時間

四、間歇滅菌方法

1.滅菌方法: 應(yīng)用不加壓力的蒸氣滅菌,某些物質(zhì)經(jīng)高壓蒸氣滅菌容易破壞,可用此法滅菌。 (1)將欲滅菌物品置于鍋內(nèi),蓋上頂蓋,翻開排水口,使器內(nèi)余水排盡。 (2)封鎖排水口,翻開進氣門,依據(jù)需求消毒10~20min。 (3)滅菌終了封鎖進氣門,取出物品待冷至室溫溫度,放入37℃溫箱過夜,次日仍按上述方法消毒,如此三次,即可到達滅菌目的。

2.血清凝結(jié)器運用方法: 培育基中含有血清或雞蛋特殊成份時,因高熱會破壞其營養(yǎng)成份,故用高溫,可使血清凝結(jié),又可到達滅菌目的: (1)在運用該法滅菌的血清等分裝時,需嚴(yán)厲遵守?zé)o菌操作,試管、平皿也經(jīng)滅菌后運用; (2)將培育基按要求使成斜面或高層,加足水后,接上電源,升溫75~90℃一小時后滅菌,放37℃溫箱過夜,再如此滅菌三次。

3.煮沸消毒: 可用煮鍋或煮沸消毒器,水沸騰后再煮5~15 min也可在水中參與2%石炭酸煮沸5min,參與0.02%甲醛,80℃煮60min均可到達滅菌目的,但選用煮沸消毒的增消劑時,應(yīng)留意對物品的腐蝕性。

4.滅菌處置: 滅菌后物品,按正常狀況已屬無菌,從滅菌器中取出應(yīng)細心反省放置,以免再度污染; (1)物品取出,隨即反省包裝的完整性,若有破壞或棉塞脫掉,不可作為無菌物品運用; (2)取出的物品,如為包裝有清楚的水浸者,不可作為無菌物品運用; (3)培育基或試劑等,應(yīng)反省能否契合到達滅菌后的色澤或形狀,未到達者應(yīng)廢棄; (4)啟閉式容器,在取出時應(yīng)將篩孔封鎖; (5)取出的物品掉落在地或誤放不潔處,或沾有水液,均視為遭到污染,不可作為無菌物品運用; (6)取出的合格滅菌物品,應(yīng)寄存于貯藏室或防塵柜內(nèi),嚴(yán)禁與未滅菌物品混放; (7)凡屬合格物品,應(yīng)標(biāo)有滅菌日期及有效期限; (8)每批滅菌處置完成后,記載滅菌品名、數(shù)量、溫度、時間、操作者。

五、有毒有菌污物處置要求

微生物實驗所用實驗器材、培育物等未經(jīng)消毒處置,一概不得帶出實驗室。

1. 經(jīng)培育的污染資料及廢棄物應(yīng)放在嚴(yán)密的容器或鐵絲筐內(nèi),并集中寄存在指定地點,待一致停止高壓滅菌。

2. 經(jīng)微生物污染的培育物,必需經(jīng)121℃,30min高壓滅菌

3. 染菌后的吸管,運用后放入5%煤酚皂溶液或石炭酸液中,*少浸泡24h(消毒液體不得低于浸泡的高度)再經(jīng)121℃,30min高壓滅菌。

4. 涂片染色沖洗片的液體,普通可直接沖入下水道,烈性菌的沖洗液必需沖在燒杯中,經(jīng)高壓滅菌前方可倒入下水道,染色的玻片放入5%煤酚皂溶液中浸泡24h后,煮沸洗濯。做凝集實驗用的玻片或平皿,必需高壓滅菌后洗濯。

5. 打碎的培育物,立刻用5%煤酚皂溶液或石炭酸液噴灑和浸泡被污染部位,浸泡半小時后再擦拭潔凈。

污染的任務(wù)服或停止烈性實驗所穿的任務(wù)服、帽、口罩等,應(yīng)放入公用消毒袋內(nèi),經(jīng)高壓滅菌前方能洗濯

六、培育基制備要求

培育基制備的質(zhì)量將直接影響微生物生長,由于,各種微生物對其營養(yǎng)要求不完全相反,培育目的的不同,各種培育基制備要求如下:

1. 依據(jù)培育基配方的成分按量稱取,然后溶于蒸餾水中,在運用前對運用的試劑藥品應(yīng)停止質(zhì)量檢驗

2. pH測定及調(diào)理:pH測定要在培育基冷至室溫時停止,因在熱或冷的狀況下,其pH有一定差異,當(dāng)測定好時,按計算量參與堿或酸混勻后,應(yīng)再測試一次。培育基pH值一定要準(zhǔn)確,否則會影響微生物的生長或影響結(jié)果的觀察。但需留意因高壓滅菌可影響一些培育基的pH降低或降低,故不宜滅菌壓力過高或次數(shù)太多,以免影響培育基的質(zhì)量,指示劑、去氧膽酸鈉、瓊脂等普通在調(diào)完pH后再參與

3. 培育基需堅持廓清,便于觀察細菌的生長狀況,培育基加熱煮沸后,可用脫脂棉花或絨布過濾,以除去沉淀物,必要時可用雞蛋白廓清處置,所用瓊脂條要預(yù)先洗凈晾干后運用,防止因瓊脂含雜質(zhì)而影響透明度。

4. 盛裝培育基不宜用鐵、銅等容器,運用洗凈的中性硬質(zhì)玻璃容器為好。

5. 培育基的滅菌既要到達完全滅菌目的又要留意不因加熱而降低其營養(yǎng)價值,普通121℃,15min即可,如為含有不耐高熱物質(zhì)的培育基如糖類、血清、明膠等,則應(yīng)采用高溫滅菌或間歇法滅菌,一些不能加熱的試劑如亞碲酸鉀、卵黃、TTC、抗菌素等,待基礎(chǔ)瓊脂高壓滅菌后涼至50℃左右再參與;

6. 每批培育基制備好后,應(yīng)做無菌生長實驗及所檢菌株生長實驗。假設(shè)是生化培育基,運用規(guī)范菌株接種培育,觀察生化反響結(jié)果,應(yīng)呈正常反響,培育基不應(yīng)貯存過久,必要時可置4℃冰箱寄存。

7. 目前,各種枯燥培育基較多,每批需用規(guī)范菌株停止生長實驗或生化反響觀察,各種培育基用相應(yīng)菌株生長實驗良好前方可運用,新購進的或寄存過久的枯燥培育基,在配制時也應(yīng)測pH,運用時需依據(jù)產(chǎn)品說明書用量和方法停止。

8. 每批制備的培育基所用化學(xué)試劑、滅菌狀況及菌株生長實驗結(jié)果、制造人員等應(yīng)做好記載,以備查詢。

七、樣品采集及處置要求

1.所采集的檢驗樣品一定要具有代表性,采樣時應(yīng)首先對該批食品原料、加工、運輸、貯藏方法條件、周圍環(huán)境衛(wèi)生狀況等停止詳細調(diào)查,反省能否有污染源存在。

2.依據(jù)食品的種類及數(shù)量,采樣數(shù)量及方法應(yīng)按規(guī)范檢驗方法的要求停止

3.采樣應(yīng)留意無菌操作,容器必需滅菌,防止環(huán)境中微生物污染,容器不得運用煤酚皂溶液,用新潔爾滅、酒精等消毒藥物滅菌,更不能含有此類消毒藥物或抗生素類藥物,以防止殺死樣品中的微生物,所用剪、刀、匙用具也需滅菌方可運用。

4.樣品采集后應(yīng)立刻送往檢驗室停止檢驗,送檢進程中普通不超越3h,如,路程較遠,可保管在1~5℃環(huán)境中,如需冷凍者,則在凍存形狀下送檢。

5.檢驗室收到樣品后,停止注銷(樣品稱號、送檢單位、數(shù)量、日期、編號等),觀察樣品的外觀,假設(shè)發(fā)現(xiàn)有下列狀況之一者,可拒絕檢驗: (1)樣品經(jīng)過特殊高壓、煮沸或其他方法殺菌者,失掉代表原食品檢驗意義者; (2)瓶、袋裝食品已啟開者,熟肉及其制品、熟禽等食品已折碎不完整者,即失掉原食品外形者(食物中毒樣品除外); (3)按規(guī)則采樣數(shù)量缺乏者; 對送檢契合要求的樣品,檢驗室收到后,應(yīng)立刻停止檢驗,假設(shè)條件不具有,應(yīng)置4℃冰箱寄存,及時預(yù)備發(fā)明條件,然后停止檢驗。

6.樣品檢驗時,依據(jù)其不異性狀,停止適當(dāng)處置。 (1)液體樣品接種時,應(yīng)充沛混合平均,按量吸取停止接種。 (2)固體樣品,用滅菌刀、剪取其不同部位共25g,置于225mL滅菌生理鹽水或其他溶液中,用均質(zhì)器攪碎混勻后,按量吸取接種。 (3)瓶、袋裝食品運用滅菌操作啟開,依據(jù)性狀選擇上述方法處置后接種。

八、 樣品檢驗、記載和報告的要求

1. 檢驗室收到樣品后,首先停止外觀檢驗,及時依照國度規(guī)范檢驗方法停止檢驗,檢驗進程中要仔細、擔(dān)任、嚴(yán)厲停止無菌操作,防止環(huán)境中微生物污染

2. 樣品檢驗進程中所用方法、出現(xiàn)的現(xiàn)象和結(jié)果等均要用文字寫出實驗記載,以作為對結(jié)果剖析、判定的依據(jù),記載要求詳細、清楚、真實、客觀、不得涂改和偽造。

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發(fā)布于 2022-11-25 14:39?IP 屬地廣東
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